Πώς μπορώ να Απομονώστε βακτήρια από το έδαφος

; εδάφους είναι μια πλούσια πηγή πολλών διαφορετικών ειδών βακτηρίων . Τα βακτήρια βοηθούν στην φυτό αποδομούμενου ζώων οργανική ύλη , για τον καθορισμό ανόργανα στοιχεία και στην αλληλεπίδραση με τις ρίζες των φυτών και των σωματιδίων του εδάφους . Ακόμη και σε ένα μικρό δείγμα εδάφους , όπως αυτή που περιέχεται σε μια κουταλιά της σούπας , υπάρχουν εκατομμύρια των μεμονωμένων βακτηρίων που υπάρχουν . Η εργασία στην απομόνωση μεμονωμένων βακτηρίων είναι να αραιώσει το δείγμα εδάφους για να πάρει την βακτηριακή συγκέντρωση είναι αρκετά χαμηλή ώστε μια ενιαία βακτήριο μπορεί να διαχωριστεί από τους άλλους και μπορεί να αναπτυχθεί σε μια καθαρή αποικία σε θρεπτικό άγαρ . Τα πράγματα που θα χρειαστείτε
ζωμό σόγιας Trypticase
5 ml δοκιμαστικούς σωλήνες , αποστειρώνονται και ανώτατο όριο
Στείρα ξύλινα ραβδιά Popsicle
Wax Μολύβ rack
Test σωλήνα
Χαρτοπετσέτες
Bleach ( διάλυμα 10 τοις εκατό )
καυστήρας Bunsen
Αγώνες βρόχο Εμβολιασμός
Τρυπτικάση άγαρ σόγιας
Petri πιάτα
Θερμοκοιτίδα
Ψυγείο

Παρουσίαση Περισσότερες οδηγίες
οι σωλήνες δειγμάτων εδάφους
Η 1 δοκιμής που χρησιμοποιούνται για την αραίωση των δειγμάτων εδάφους .

αναιρέσει corked αποστειρωμένο δοκιμαστικό σωλήνα που εμπεριέχει 5 ml θρεπτικού ζωμού σόγιας τρυπτικάσης . Επιλέξτε ένα στείρο Popsicle stick . 2
Χρησιμοποιήστε μια αποστειρωμένη Popsicle ραβδί για να συλλέγει το έδαφος .

Πήγαινε έξω και να συλλέξει ένα μικρό δείγμα του εδάφους με την άκρη του ραβδί Popsicle , χρησιμοποιώντας άσηπτη τεχνική , μια μέθοδος για να εξασφαλιστεί το δείγμα δεν έχει μολυνθεί και ο χρήστης δεν έχει μολυνθεί.
εικόνων 3

Αφαιρέστε το κάλυμμα δοκιμαστικό σωλήνα και προσθέστε το έδαφος στο θρεπτικό ζωμό στο δοκιμαστικό σωλήνα . Ανακατέψτε το χώμα μέσα στο ζωμό με το ραβδί Popsicle . Καλύψτε το δοκιμαστικό σωλήνα με το καπάκι . Γράψτε την ημερομηνία συλλογής και της συλλογής τοποθεσία στην πλευρά του δοκιμαστικού σωλήνα με τη χρήση του κεριού Μολύβ .
Η

4 Τοποθετήστε το δοκιμαστικό σωλήνα σε ένα ράφι δοκιμαστικό σωλήνα για περίπου 30 λεπτά ώστε το έδαφος να εγκατασταθούν σε το κάτω μέρος .
εικόνων μολύνονται τρυβλίο Petri
5

Αποστειρώστε την επιφάνεια εργασίας με τον καθαρισμό με 10 τοις εκατό διάλυμα χλωρίνης και χαρτοπετσέτες .
Η 6

Γυρίστε το τρυβλίο Petri , ώστε το κάτω κάλυμμα που περιέχει το άγαρ είναι επάνω. Σχεδιάστε ένα T στο κάτω βλέφαρο , με το οριζόντιο δοκάρι του Τ χωρίζει από το ανώτερο ένα τρίτο του καλύμματος και το στέλεχος του Τ διαιρώντας τα κάτω δύο τρίτα στο μισό .
Η 7 Χρησιμοποιήστε ένα καυστήρα Bunsen στη φλόγα κρίκοι ενοφθαλμισμού .

Ενεργοποίηση και ανάψετε τον καυστήρα Bunsen . Φλόγα ο βρόχος εμβολιασμού κατά της φλόγας του καυστήρα Bunsen .
8

Αφαιρέστε το πώμα από το δοκιμαστικό σωλήνα και να αγγίξει τη θηλιά στο ανώτερο στρώμα του υγρού σαφέστερη . Αποσύρετε το βρόχο και πάλι ο δοκιμαστικός σωλήνας .
Εικόνων Η μέθοδος T - Streak
Η 9 Κάντε μια τεθλασμένη γραμμή πάνω από το ένα τρίτο του πιάτου .

Χρησιμοποιήστε το οριζόντιο δοκάρι του T που συνέταξε στο πίσω μέρος του κάτω καλύμματος ως σημείο αναφοράς . Αγγίξτε το βρόχο εμβολιασμού στη μία πλευρά του χώρου πάνω από το οριζόντιο δοκάρι T και να επιστήσει την άκρη πάνω από την επιφάνεια του άγαρ σε μια τεθλασμένη γραμμή , που τελειώνει τη γραμμή στην απέναντι πλευρά του χώρου .
Η 10

Αφαιρέστε το βρόχο εμβολιασμού και κλείστε το τρυβλίο Petri . Φλόγα τη θηλιά στον καυστήρα Bunsen , και αφήστε το να κρυώσει λίγο . Ανοίξτε το τρυβλίο Petri και να αγγίξει το βρόχο σε ένα σημείο κοντά στο τέλος της γραμμής που έχουν ήδη θεσπιστεί από το βρόχο . Κάντε μια άλλη τεθλασμένη γραμμή καθέτως προς την πρώτη γραμμή , που καλύπτει το πρώτο διάστημα κάτω από το οριζόντιο T και στη μία πλευρά του κορμού .
Η 11

Αφαιρέστε το βρόχο και κλείστε το τρυβλίο Petri . Φλόγα του βρόχου και πάλι , ανοίξτε το τρυβλίο Petri , και να αγγίξει το κρυώσει λίγο βρόχο στη δεύτερη γραμμή κοντά στο τέλος της . Σχεδιάστε μια άλλη τεθλασμένη γραμμή κάθετα προς τη δεύτερη γραμμή στο υπόλοιπο ελεύθερο χώρο στο τρυβλίο Petri .
Η 12

Κλείστε το τρυβλίο Petri μετά την αφαίρεση του βρόχου . Φλόγα του βρόχου και βάλτε το στην άκρη . Απενεργοποιήστε τον καυστήρα Bunsen .
Εικόνων Δευτεροβάθμια Πολιτισμός

13 Επιλέξτε μια ενιαία αποικία για να απομονώσει περαιτέρω βακτήρια .

Βάλτε το τρυβλίο σε ένα φυτώριο στους 30 βαθμούς Κελσίου για 48 ώρες . Πάρ 'έξω και να εξετάσει το άγαρ για την ανάπτυξη των βακτηριακών αποικιών . Επιλέξτε μια αποικία που φαίνεται ενιαία και διακριτή στη συνολική εμφάνιση , μια ένδειξη ότι η αποικία προέκυψε από ένα μόνο βακτήριο . Κυκλώστε την θέση της αποικίας στο πίσω μέρος του κάτω καλύμματος με το μολύβι σήμανση .
Η 14

Φλόγα ο βρόχος εμβολιασμού . Ανοίξτε το τρυβλίο Petri και πιέστε το ελαφρά ψύξη βρόχο στο κέντρο της αποικίας .
Η

15 Επαναλάβετε τα βήματα για την κατασκευή ενός T - ράβδωση σε ένα νέο τρυβλίο Petri με άγαρ στο κάτω μέρος του καπακιού . Όταν η ράβδωση γίνεται και το τριβλίο petri είναι κλειστή , να γράψει την ημερομηνία και το δείγμα εδάφους το εμβόλιο ελήφθη από την κάτω πλευρά του κατώτερου καλύμματος . Απενεργοποιήστε τον καυστήρα Bunsen .
Τετάρτη 16

Επωάστε το τρυβλίο Petri στους 30 βαθμούς Κελσίου για 48 ώρες . Εξετάστε τις αποικίες που έχουν αναπτυχθεί στο άγαρ , ψάχνει για ομοιομορφία του χρώματος , σχήμα και υφή . Επαναλάβετε τη διαδικασία δευτερογενούς καλλιέργειας αν υπάρχουν αποικίες που αποκλίνουν σημαντικά σε εμφάνιση από τους άλλους , που δείχνει ότι μια και μόνο βακτήριο δεν απομονώθηκε .
Η 17 Όμοια εμφάνιση αποικίες δείχνουν βακτηριακή απομόνωση .

ψυγείο η πλάκα άγαρ που περιέχει πανομοιότυπα -εμφανίζονται αποικίες σε αυτό, με την ομοιομορφία είναι μια καλή ένδειξη ότι μόνο ένα βακτήριο έχει απομονωθεί από το δείγμα εδάφους .
Η 18

εκτελέσει άλλες δοκιμές για ταυτοποίηση του απομονωμένου βακτηρίου αν είναι επιθυμητό , όπως λεκέδες γραμμάριο, μικροσκοπική εξέταση και καλλιέργεια σε διαφορετικά είδη άγαρ .
Η
εικόνων